[太原二模]山西省太原市2024年高三年级模拟考试(二)2答案(生物)

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22(12分)人们只要将一个不含启动子的基因或片段的3末端以相反的方向接上一个启动子,然后导入到植物基因组中,就可产生反义RNA,通过与靶基因的RNA特异互补,以抑制植物内源基因组上相应基因的表达,产生反义RNA的基因或片段相应地称为反义基因。野生型MO基因是植物抗白粉病的调控因子,可赋予多种植物对白粉菌的广谱抗性,构建烟草反义M1o基因的植物表达载体pB121M©,对烟草进行遗传转化,可获得该基因表达的缺陷型植株。下图为构建烟草反义表达载体的其中部分过程pBLUE-T载体pBLUE-MlopBI121载体Sma IMo基因BamHIBamH ISmaISma I+BamHIpBI 121-ulopBI 121-MloBamHISmaIM1o基因回答下列问题:(1)从烟草叶片中提取总RNA,利用过程得到cDNA,再以双链DNA为模板,利用设计的引物(上游引物P1、下游引物P2)通过PCR扩增MIo基因,若只用一个DNA为模板,四次循环后,含有PI的DNA分子有个。(2)BamHI和SmaI的识别序列分别为GIGATCC和CCCIGGG,将pBLUE-MIo和PBI121载体混合得到PBI121-M1o时,需用的连接酶是则在构建PB12一Mo表达载体时,需在引物P1上添加若图中箭头方向代表载体中基因转录方向,酶的识别序列。(3)植物表达载体PBII2T-M1o是否连接成功,还需要对连接后的DNA利用进行鉴定,将连接成功后的植物表达载体导入植物细胞可采用我国科学家独创的电泳法基因进人受体细胞后,是否稳定表达其遗传特性,可通过法,目的检测。二
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