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注：图中Pstl、KpnI、EcoRI、Hind表示限制酶，不同限制酶切出的黏性末端均不同；Klenow,能将黏性末端转变为末端。①过程③将CyIA基因与GNA基因相连，可选用(填“E-coli DNA连接酶'或“TDNA连接酶”)。②让农杆菌侵染烟草叶片前，需要通过实验筛选农杆菌：将培养农杆菌的培养基倒板后均分为A、B两组，在A组培养基中涂布一定量的二，在B组培养基中涂布等量的卡那霉素和链霹素。往A组培养基中接种适量农杆菌，待长出菌落后，用影印法接种到B组培养基上，实验结果如图2，其中2、3、5菌落对应的农杆菌可能是（填“符合”或“不符合”)要求的。30影拉养5020A组B组图2③欲从个体生物学水鉴定这些转基因烟草是否具有双抗虫特性以及抗性的程度，请简述该鉴定方法：(2)抗烟草花叶病毒(TMV)烟草品种培育：绞股蓝（一种植物）细胞中含有抗TMV的基因LEA,能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草：①已知LEA基因两侧没有与载体相同的酶切位点识别序列，则利用PCR扩增LEA基因时，需要在引物的(填3端”或“5端”)添加相应序列。②现利用ELISA技术，通过LBA蛋白抗体和LEA蛋白特异性结合原理，来实现对LEA蛋白的定量检测（图3)。下列说法错误的是（多选)。酶标抗体有色底物光信号检测无色底物固相抗体细胞上清液队蛋充分洗涤图3A.酶标抗体具有免疫学活性和酶活性，具有多个活性位点B.固相抗体和酶标抗体竞争性结合LEA蛋白同一活性位点C.实验需设置仅有酶标抗体或仅有上消液的两组对照实验D.反应体系中光信号越强，则细胞上清液LEA蛋白含量越高E.需给予足够长的时间使无色底物充分反应后检测光信号(3)烟草性状遗传特点：烟草是雌雄同株植物，却无法自交产生后代。这是由S基因控制的遗传机制所决定的。研究发现，烟草的S基因分为S1、S2、S等15种，如果花粉所含S基因与母本的任何一个S基因种类相同，花粉管就不能伸长完成受精。S基因包含控制合成S核酸酶和S因子的两个部分，前者在雌蕊中表达，后者在花粉管中表达。自交传粉后，雌蕊产生的S核酸酶进入花粉管中，与对应的S因子特异性结合，进而将花粉管中的RNA降解，据此分析花粉管不能伸长的直接原因是。现有基因型为S1S2和S2S3的烟草隔行种植，全部子代基因型及比例为宜荆荆随恩重点高中教科研协作体*生物学试卷（共8页)第8页