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A.培养液中添加的“NAA十BA”可以促进愈伤组织细胞增殖限制酶识别序列及酶切位点B.选取红豆杉树皮做外植体不易获得紫杉醇BglⅡAY GATCTC.紫杉醇为红豆杉体内生长所必需的一种次生代谢物BstEⅡGGTAACCD.外植体的使用及整个培养过程中需要保证严格的无菌环境Sac IGYAGCTC二、非选择题：本题共2小题，共28分。Msp IGYCGG9.(13分)中国科学家成功突破了克隆猴这个世界生物学前沿的难题。体细胞克隆猴Bam HIGYGATCC的成功，将推动中国率先发展出基于非人灵长类疾病动物模型的全新医药研发，加速针对自闭症等脑疾病，以及免疫缺陷、肿瘤的新药研发进程，标志着中国在非人灵高效表达BgⅡBstEⅡ标准DNA CBHⅡ123启动子23130bp长类疾病动物模型研究中处于国际领先地位。请回答下列问题：SacI抗生素M9416抗性基因(1)克隆猴的诞生，体现了动物细胞的具有全能性。相对于植物组织培MspI>pUT质粒2233bp养而言，动物尤其是高等动物的克隆比较困难的原因是抗生素N?克隆过程中一般利用未受精的去核卵母细胞作为受体细抗性基因BamHI胞，原因是图1图2(2)动物细胞工程的基础是,克隆猴培养过程中需要用酶切酶切处理，以形成分散的细胞。为了提高动物细胞克隆成功率，可位点1位点2CBHⅡA链5红20以选择适宜的培养基，添加等天然成分，以滋养细胞支持生基因B链3酶切5维16长。培养箱中通常要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是煃接280BstEⅡBgI素含量4(3)下图是运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的示意图，①~⑤代表相关过程，pUT质粒启动子(%)0a~g代表相关细胞。对照组1对照组2B菌图3图4b②●(1)CBHⅡ基因两端需添加相关酶切位点才能与pUT质粒连接，因此在扩增细胞集落①OOcCBHⅡ基因时，需要在两种引物上分别添加序列和③体外培养抗体序列。d eg888户⑤(2)为鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒导入A菌，并将其接种在含阳性的培养基上培养，然后提取3个不同菌落的质粒分别进行双酶切验def体内培养（腹腔）证，将酶切片段和CBHⅡ基因分别进行电泳，结果如图2所示。据此分析，菌I.过程①是给小鼠注射S抗原蛋白，其目的是落中成功导入了重组质粒。，;过程②的促融方法可以有(写出1种(3)图3中B链为转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为5'→3'。为了使生物促融的方法)。CBHⅡ基因按照正确的方向与已被酶切的pUT质粒连接，图中酶切位点1和Ⅱ.图中过程③④为两次筛选过程，过程③是指把c细胞群稀释，然后都放在选酶切位点2所对应的酶分别是择培养基的多孔培养皿中培养，只有能够存活且增殖，(4)为检测B菌的纤维素分解能力，将含有20%纤维素的培养基分为三组，进行不因此细胞集落为单个存活细胞的克隆；过程④是用方同处理后，在相同条件下培养一段时间，测定培养基中纤维素含量，结果如图4法，经多次筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群。所示，则对照组2的处理为,说明10.(15分)研究人员从土壤中分离获得能分解纤维素的细菌(A菌)，从A菌中提取一预期该工程菌在处理废弃物及保护环境方面可能的应用，举一个实例：种纤维素酶基因(CBHⅡ)并进行PCR扩增，然后与高效表达载体pUT质粒（图1）连接构建成重组质粒并导入A菌，从而获得分解纤维素能力更强的工程菌(B菌)。【JKT·单元周测卷·生物（十五）第3页（共4页）】【JKT·单元周测卷·生物（十五）第4页（共4页）】