[文海大联考]2025届高三信息卷生物(S)答案

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22.(18分)细菌中的M蛋白在酶X的作用下被ATP磷酸化,磷酸化的M蛋白积累会抑制细菌的生长,酶Y则可使其发生去磷酸化。研究人员用X基因(编码酶X)、Y基因(编码酶Y)和GFP基因(编码绿色荧光蛋白)构建3种融合基因(GFP基因均位于融合基因的上游),并将3种融合基因分别导入不含X和Y基因的大肠杆菌中,以研究酶Y的功能。回答下列问题。GFP基因X基因Y基因引物3启动子终止子融合基因a引物4物1引物2GFP基因X基因张融合基因b复制原点GFP基因Y基因卡那霉素/抗性基因融合基因c图1(1)将融合基因a和质粒构建的基因表达载体导入大肠杆菌后,接种在含卡那霉素的培养基上,从长出的菌落中提取DNA,选用引物组合进行PCR,以检测融合基因a是否正确插入。若实验操作规范但未获得扩增产物,其原因可能是(2)构建融合基因b时,应将GFP基因中编码的序列删除,使得受体细胞合成GFP-酶X融合蛋白。为检测导入融合基因b的工程菌内融合基因b是否完整表达以及酶X的活性,首先从具有特征的芦落中提取蛋白质进行电泳,在泳道中添加的物质还应包括,后续实验用特异性识别磷酸化的M蛋白的抗体检测,通过是否出现阳性结果来判断酶X的活性。(3)将以上3种融合基因分别转化的工程菌与未转化的大肠杆菌通过法接种到同一板的①~④区域。一段时间后,菌落生长状况如图2所示,推测导入融合基因a的工程菌被接种在图中的区域。为从中筛选出高活性酶Y的突变菌株,基本思路是③4图2高三生物学试卷(共8页)第8页
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